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死體積對柱效的影響

點擊次數(shù):11704 發(fā)布時間:2012-03-30

 

我們可以設想這樣一個場景,在一條湍急的河流中倒入一瓶墨水,墨水首會是一個小小的點,漸漸順水流而行一點點擴散,而到下游的時候肯定已不再是一個點,而是一個寬寬的譜帶了。這個現(xiàn)象*適用于HPLC的分析,試想樣品由進樣器起步為一個小小的點,流經管路和色譜柱,當?shù)竭_檢測池時必然也像墨水一樣不可避免的有擴散,如果擴散小那么色譜圖中峰寬就小,擴散大峰寬也大。為了得到較小的理想峰寬,我們就不得不討論到一個常見的術語——死體積。
液相中的死體積,是指不被固定相滯留的組分,從進樣到其出現(xiàn)zui大峰值時,所消耗流動相的體積。死體積包括三個部分:進樣器至色譜柱管路及色譜柱出口管路的體積;色譜柱內固定相顆粒間的間隙(被流動相所占據,Vm);的體積;檢測器流動池的體積。本文中重點討論系統(tǒng)管路對色譜峰寬的影響。
就像小河一樣,如果河流窄的話,墨水肯定擴散就小,同樣,液相系統(tǒng)管路細,擴散就小。那么管路的粗細到底對譜圖的結果有多大的影響,筆者在長期檢驗色譜柱柱效的工作中有過這樣的經歷:把進樣器到色譜柱這一段管路,內徑由0.25mm更換成0.5mm,筆者發(fā)現(xiàn)本來柱效合格的色譜柱變的遠遠低于合格標準,即由80000N/m的柱效下降到了50000N/m,如下圖,峰展寬明顯。

 

而0.5mm在液相色譜系統(tǒng)中其常見,一般多用于壓泵出口到進樣器這一段,可以降低系統(tǒng)壓力。而進樣器之后則盡可能選擇較細的管路。
因此,為避免柱效降低及峰展寬的發(fā)生,應盡量減少連接管路的長度,縮小連接管路的直徑,減少系統(tǒng)中的死體積。
上面都為筆者工作中小小心得,有不科學的地方希望同行能給予指正,共同進步。
 

 

 

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